染色 (Staining)
- 目的：玻片須染色，使原本無色的細胞物質可在光學顯微鏡下顯現。
- 常用染劑：Mohs 玻片一般用 hematoxylin and eosin (H&E)、toluidine blue，偶用特殊免疫組織化學染色 (immunohistochemical stains)；H&E 為 MMS 最常用。
- H&E 流程：將組織依序置入一系列溶液——alcohol、water、xylene、hematoxylin、eosin；高量實驗室用自動染色機 (automatic slide stainer) 縮短處理時間 (Fig. 29-17)。
- Toluidine blue：以變色性 (metachromatic) 方式將 BCC 周圍黏多醣 (mucopolysaccharides) 染成鮮豔粉紅，凸顯 BCC 島。
- 蓋玻片 (cover-slip)：染色後加一層膠狀介質再蓋薄玻璃蓋片，保護組織不被刮除並可長年保存。
- 脫水要訣：若從固定劑（通常為 alcohol）移出太快，組織脫水不當，染色不理想。
免疫組織化學 (Immunohistochemistry)
- SCC 與 Paget’s disease：cytokeratins。
- dermatofibrosarcoma protuberans：CD34。
- 黑色素瘤 (melanoma) 冷凍切片判讀輔助：HMB-45、MART-1、S-100（用於 desmoplastic 亞型）、MITF（核染色佳）、mel 5；整體而言 MART-1 為黑色素瘤最有用的染色。
- 限制：試劑成本、缺自動化染色設備、額外處理時間與技術員技能時間，使 Mohs 醫師對免疫染色的普及採用變慢。
- 無論是否用免疫染色，較困難病例仍可取永久切片 (permanent sections) 進一步確認邊緣乾淨；免疫染色完整討論見第 30 章。
- 漂浮物 (floater)：染色液污染可引入，會隨機出現（不一定與檢體相連）；定期更換染色液可減少。
圖 29-17：自動 H&E 染色裝置，三張玻片正在染色。染色序列由固定劑→hematoxylin→bluing agent→eosin→alcohols→xylene，最後蓋玻片、與申請單核對，呈交 Mohs 醫師判讀。