切片與玻片固定 (Cutting and Slide Fixation)
- 流程：檢體包埋冷凍並架上載台後，於 microtome 切片並放上玻片 (Fig. 29-16)。夾具多有 ball-and-socket joint 供微調對位，切入塊前須確保刀片角度正確。
- 修面 (facing the block)：開始轉動切片刀時，須先切掉外層 OCT 直到觸及真正檢體；觸及後可能需重新對位以求切片均勻。若檢體底面早期未與刀片平行，會造成切片不完整與需切更深。
- 切片厚度：包埋介質修整完後，將水平 (horizontal) 5 至 10 微米 (5- to 10-micron) 切片貼上玻片（厚度視個人偏好）。切片太厚難判讀（細胞細節被遮）、脂肪組織可能需較厚切片；太薄則出現孔洞或撕裂。
- 第一張玻片最重要：代表真正邊緣 (true margin)，因組織是由深部邊緣向皮膚表面逐刀往上切。
- 計算深度：技術員須計算轉輪次數並知道每轉的微米數，以正確計算組織深度。平均做兩張玻片、每張兩到三段切片，多數醫師希望總共看到三到六段 (three to six sections)。
- 脂肪切片要訣：脂肪在適合切其他組織的溫度下不夠硬，可對含脂肪檢體噴 cryogen 降溫後再切，不必重設 cryostat 溫度。
- 皺褶與折疊：幾乎都發生在檢體推過刀片及拾取切片放上玻片時；可用 antiroll bars（防止捲出切面）或 plates、camel hair brushes（置於 cryochamber 刷架）減輕捲曲。
- 刀片問題：鈍刀導致撕裂、捲曲或 chatter lines；刀刃上微小缺口可造成大撕裂；須檢查缺口、磨利永久刀片並沿刀座移動拋棄式刀片。
- 漂浮物 (floaters)：刀片不乾淨會引入漂浮物，可能出現於多張玻片而難以辨識。
- 多段切片放置：放每段後須擦掉玻片上多餘包埋介質再放下一段；若蓋在前一段介質上會在固定時黏不牢、染色時被沖掉或干擾染色；故習慣從上角開始、沿對角線斜放各段。
- 過度修面 (excessive facing) 的危害：切掉高處組織會永久失去真正邊緣，造成偽陰性 (false-negative) 或偽陽性 (false-positive)。應使用高品質玻片；帶電玻片（plus slides）可改善組織附著。
圖 29-16：(A) 轉動 cryostat 輪在滾板上取切片。(B) 刷子置於滾板上；水平切片採由下而上 (bottom-up) 方式，前幾段代表含皮膚緣與較深組織的真正手術邊緣。(C) 再將組織轉移到玻片。