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切割與染墨 (Sectioning and inking)

  • 有些腫瘤可於處理前切成兩塊以上;但以單一標本配四個均勻分布的不同顏色標記,於將顯微鏡發現與病人部位對應時可提供清楚指引。
  • 單切片法 (single-section method) 由 Randle 等人描述,可縮短玻片製備與判讀時間,並減少出錯機會。
  • 決定何時需分割標本的主要因素:顯微鏡玻片的尺寸,以及技術員可用的冷凍與包埋技術。凸形與凹形標本、厚標本,以及含軟骨或骨的標本,通常需分割才能壓平至單一平面。
  • 決定適當分割後,強化刻痕並吸乾組織以去除多餘水分 (Fig. 29-9);於切除組織的刻痕上塗染料並記錄於切除時所繪的圖上 (Fig. 29-10)。染墨可由術者本人或技術員執行。
  • 染墨在沿大部分手術邊緣施染(而非僅在標本極點作定向點)時最有幫助;此時缺墨即代表該邊緣無法完整評估。多數 Mohs 術者使用紅、藍、黑,可能再加一兩種其他顏色。
  • 將組織切成多於一段會提高標本貼錯標籤或術者於錯誤切段標測陽性邊緣的機率,也增加偽陽性與偽陰性邊緣的風險。
  • 若用墨過多,墨可能溢流而混淆邊緣;標本過濕也會如此,故強調標記前須吸乾組織 (Fig. 29-11)。品質不佳的墨可能難以判讀,並可能在組織製備時被沖掉。

圖 29-9:(A) 吸乾組織以去除多餘水分。(B) 術者於取下組織時以刻痕劃記,技術員強化這些小標記以利將手術邊緣壓平至單一平面;有時組織需更多放鬆切口才能整個平放,若無法達成則分割成數段,確保組織雖分塊但落於同一平面。

圖 29-10:(A) 市售染料系統與塗抹棒置於穩固支架;組織充分放鬆後,於刻痕塗墨以協助術者在需更多階段時定向。(B) 以棉花棒沾組織染料標記,染料在組織化學染色過程中仍保留於組織;對相鄰邊緣施不同顏色墨時,宜自被標記側接近邊緣以防墨汙染並滲流至非預期邊緣。

圖 29-11:(A,B) 染墨、放鬆後的組織置於標籤玻片上、深層邊緣朝下,以鑷子將組織邊緣撥平於玻片。(C) 常需冷凍噴霧 (freeze spray) 協助將組織以平整構型固定於玻片。壓平很重要,使表皮、真皮與皮下脂肪位於同一平面。