分區與染墨 (Sectioning and Inking)
有些腫瘤可在處理前分區成兩片或更多片;然而,以四個均勻配置、不同顏色的標記來分析單一標本,在將顯微鏡下所見與其在病人身上的位置相對應時,能提供清楚的方向指引。此單一切片法 (single-section method) 由 Randle 等人描述,30 能將玻片製備與玻片判讀所需的時間降至最低,同時也減少出錯的機會。31
決定何時需要將標本細分的主要因素,是顯微鏡玻片的大小,以及技術員可運用的冷凍與包埋技術。凸形與凹形標本、厚標本,以及含有軟骨 (cartilage) 或骨 (bone) 的標本,通常需要分區才能攤平成單一平面。一旦決定適當的分區方式後,將標記切口 (hash marks) 加深,並將組織吸印 (blotted) 以去除多餘水分 (Fig. 29-9)。將染料施加於切除組織上的切口處,並記錄於切除時所繪製的圖上 (Fig. 29-10)。有些 Mohs 外科醫師自行進行染墨,而其他 Mohs 外科醫師則將此項工作委派給技術員。以切口與顏色分析標本,在將顯微鏡下所見與其在病人缺損上的位置相對應時,能提供清楚的方向指引。當墨水沿著手術邊緣的相當一部分施加,而非僅在標本極點作為定向點時,染墨最有助益。在此情況下,缺少墨水即表示某一邊緣未被完整評估。多數 Mohs 外科醫師為此使用紅、藍、黑,可能再加一或兩種其他顏色。
它們在 Mohs 圖上以符號表示,以供定向之用。
從被標記的那一側接近邊緣,以防止墨水汙染並滲流至非預期的邊緣。(C) 標本的定向、形狀、參考標記位置與染墨樣式皆描繪於圖上。在此範例中,XX 為黃色,= 為紅色,….. 為綠色,而四條垂直線代表藍色。使用這些符號,使得黑白影本仍能被判讀。
將組織切成一片以上的切片,會增加標本被錯標的機會,或使 Mohs 外科醫師將陽性邊緣 (positive margins) 錯誤地標示於不正確的切片上。較多的切片也會增加偽陽性 (false-positive) 與偽陰性 (false-negative) 邊緣的風險。31
若使用過多墨水,墨水可能不慎溢流並混淆邊緣。若標本過濕亦可能發生此情形,因而凸顯了在標記前吸印組織的必要性 (Fig. 29-11)。品質不佳的墨水可能難以判讀,且可能在組織製備過程中被洗掉。

圖 29-9:(A) 將組織吸印 (blotted) 以去除多餘水分。(B) 組織在移除時由 Mohs 外科醫師以標記切口 (hash marks) 劃刻。這些小標記由技術員加強,以利將手術邊緣攤平成單一平面。除了強化既有標記外,有時組織會需要更多的鬆解切口 (relaxing cuts) 才能將整個標本攤平。當無法以此技術達成時,將組織分區,以確保組織位於單一平面上,即便是分成數片。

圖 29-10:(A) 將市售染料系統 (dye system) 連同塗抹器置於穩定的支架中。一旦組織已被令人滿意地鬆解,即將墨水施加於組織上的標記切口處,以協助 Mohs 外科醫師在需要更多階段時進行定向。(B) 以棉籤 (cotton-tipped applicator) 用組織染料 (tissue dye) 標記組織,該染料會在組織化學染色 (histochemical staining) 過程中留存於組織上。對鄰近的組織邊緣施加不同顏色的墨水時,宜……

圖 29-11:(A,B) 將染墨且鬆解後的組織置於標記好的玻片上,深層邊緣朝下。使用鑷子 (forceps) 將組織邊緣撥平貼於玻片上。(C) 許多時候需要冷凍噴霧 (freeze spray) 來協助將組織以攤平的構形固定於玻片上。攤平很重要,使得表皮 (epidermis)、真皮 (dermis) 與皮下脂肪 (subcutaneous fat) 位於同一平面。