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免疫性水疱病 (Immunobullous disease)

• 取樣部位：直接免疫螢光 (direct immunofluorescence, DIF) 切片應取自非水疱性的病灶皮膚，或距水疱約 1 cm 內的病灶周圍皮膚 (perilesional skin)；非水疱性病灶皮膚的陽性率較高。
• 應避免下肢皮膚，因偽陰性 (false-negative) 風險較高。
• 光學顯微鏡 (light microscopy) 檢體應盡可能含完整的水疱或大疱；較大病灶的檢體應同時包含水疱與完整皮膚，使含水疱邊緣與部分大疱。
• 技術：小水疱用打孔切片 (punch biopsy) 或削除切除 (shave excision)；欲完整取得較大大疱可用挖勺式削除 (scooped shave)。
• 檢體運送：DIF 檢體應置入 Michel’s medium 或 Zeus medium；部分免疫皮膚病理實驗室偏好以生理食鹽水 (saline) 運送以降低背景染色，食鹽水保存的檢體應於 24 小時內處理。
• 若誤置入福馬林 (formalin)，應立即取出並以生理食鹽水沖洗；短暫浸泡福馬林會使天疱瘡 (pemphigus) 出現偽陰性，但對以真皮–表皮交界沉積為特徵的疾病則不會。
• 對提示表皮下水疱病的張力性水疱 (tense blisters)，曾以單一打孔技術同時取得 H&E 與 DIF 檢體，並提供類似鹽裂 (salt-split) 的診斷資訊。